一、7-氨基頭孢烷酸簡(jiǎn)介：

   7-氨基頭孢烷酸(7ACA)是很重要的頭孢原料藥中間體。其分子結(jié)構(gòu)(見(jiàn)圖1)。在其生產(chǎn)過(guò)程中，除主要的組份7ACA外。還含有少量的去乙酰7-氨基頭孢烷酸(D-7ACA)、去乙酰氧72氨基頭孢烷酸(DO-7ACA)、頭孢烷酸(CPC)。成都科捷應(yīng)用研究所采用反相高效液相色譜法分離測(cè)定了7ACA的含量及其有關(guān)物質(zhì)，在較短時(shí)間內(nèi)完成分離測(cè)定，重復(fù)性、精密度及可靠性良好,可用于該品的質(zhì)量控制。
 
二、LC-10Tvp梯度高效液相色譜儀配置
LC-10Tvp高壓恒流泵：2臺(tái)
SPD-10Tvp紫外檢測(cè)器：1臺(tái)
SCL-10Tvp 系統(tǒng)控制器：1臺(tái)
7725i手動(dòng)進(jìn)樣閥： 1套
色譜工作站：1套    （VI2010、N2000、N3000選用）
液相色譜柱：1支     （C18 4.6*250mn,5um）
微量進(jìn)樣器：1支     （50ul/100ul）
   進(jìn)樣支架  ：1只     （進(jìn)樣閥用）
三、LC-10Tvp梯度高效液相色譜儀特點(diǎn)
LC-10Tvp梯度高效液相色譜儀是成都科捷分析儀器有限公司為了快速地滿足多樣化的客戶需求，在原有的STI501液相色譜儀的基礎(chǔ)上經(jīng)過(guò)優(yōu)化，利用美G先進(jìn)技術(shù)開(kāi)發(fā)設(shè)計(jì)，G內(nèi)加工生產(chǎn)的的一款新型的液相色譜儀。LC-10Tvp等度高效液相色譜儀實(shí)現(xiàn)了人機(jī)對(duì)話，可實(shí)時(shí)對(duì)儀器的運(yùn)行狀態(tài)進(jìn)行監(jiān)控，并可對(duì)潛在和已出現(xiàn)的故障做出判斷，同時(shí)提供在線解決方案。該儀器也全面實(shí)現(xiàn)了遠(yuǎn)程的準(zhǔn)無(wú)人操作，大大提高了儀器的使用效率，同時(shí)通過(guò)高精度的AS1000自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化進(jìn)樣，**大程度抑制了樣品的交叉污染，提供樣品分析精度。LC-10Tvp等度高效液相色譜儀可廣泛應(yīng)用于研究開(kāi)發(fā)、醫(yī)藥檢驗(yàn)、食品檢測(cè)、化工分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)等眾多分析*域。
 
主要特點(diǎn)
    豐富的功能——符合客戶對(duì)分析的不同需求
    硬件具有VP功能，記錄維護(hù)信息和操作記錄，符合GLP/GMP要求；系統(tǒng)控制器增具有時(shí)鐘、溫度計(jì)、濕度計(jì)等人性化設(shè)計(jì)的功能。
    **的性能——滿足客戶對(duì)儀器的嚴(yán)格要求
    檢測(cè)器采用進(jìn)口氘燈、光電池以及1200條/mm凹面光柵組成的雙光束單色器；精密加工的雙透鏡流通池，控制波長(zhǎng)調(diào)節(jié)的高精度微處理器以及雙路高速的采樣頻率，確保了低噪聲、低漂移及超高靈敏度等特點(diǎn)。
    VI2010工作站符合多種法規(guī)要求。
    可靠的結(jié)果——滿足客戶對(duì)結(jié)果的準(zhǔn)確要求
    與進(jìn)口儀器做對(duì)比試驗(yàn),分析結(jié)果具有高度的一致性。
    簡(jiǎn)便的操作——便于客戶對(duì)軟件的熟練操作
    軟件采用多窗口模式，操作方便。
    精美的外觀——滿足客戶對(duì)儀器的視覺(jué)要求
    外形精美，帶來(lái)視覺(jué)上的享受。
技術(shù)指標(biāo)

LC-10Tvp高壓恒流輸液泵
輸液方式	微體積串聯(lián)雙柱塞
**大輸液壓力	0～9999Psi
流量設(shè)定范圍	0.001～9.999ml/min   （以0.001ml/min步長(zhǎng)調(diào)節(jié)流量）
流量設(shè)定值誤差	≤0.5%
流量穩(wěn)定性誤差	≤0.2%RSD
壓力脈動(dòng)	小于15Psi   （流量1mL/min，壓力600～1600Psi 。）
泵密封性	壓力為5400Psi，時(shí)間為10min，壓降小于400Psi 。
時(shí)間程序功能	有
尺寸	W260×H130×D420mm
重量	11kg
使用環(huán)境溫度范圍	4～40℃
SPD-10Tvp紫外可見(jiàn)可變波長(zhǎng)檢測(cè)器
波長(zhǎng)范圍	190nm～700nm
波長(zhǎng)示值誤差	≤±1nm
波長(zhǎng)重復(fù)性誤差	≤±0.1nm
動(dòng)態(tài)噪聲	≤ ±0.75×10-**U  （甲醇，1ml/min，254nm，20℃ 。）
靜態(tài)噪音	≤ ±0.5×10-**U  （空池，響應(yīng)時(shí)間1秒，20℃ 。）
動(dòng)態(tài)基線漂移	≤±1×10-4AU/h   （甲醇，1ml/min，254nm，20℃ 。）
靜態(tài)基線漂移	≤0.5×10-4  （空池，響應(yīng)時(shí)間1秒，20℃ 。）
線性范圍	≥104
**小檢測(cè)濃度	≤1×10-9g/mL  （萘/甲醇溶液）
定性重復(fù)性	RSD6≤ 0.1%
定量重復(fù)性	RSD6≤ 0.5%
光譜帶寬	6nm
流通池體積	8μL
光程	10mm
時(shí)間程序功能	有
尺寸	W260×H130×D420mm
重量	11kg
使用環(huán)境溫度范圍	4～40℃

 #p#分頁(yè)標(biāo)題#e#
四、高效液相色譜法測(cè)定7-氨基頭孢烷酸含量檢測(cè)方法
1　儀器與試劑
成都科捷LC-10Tvp高效液相色譜儀
瑞士梅特勒AG245電子天平(十萬(wàn)分之一)
PHS225酸度計(jì)(上海雷磁儀器廠)
超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)
Milli-Q純水器(Millipore)
乙腈為色譜純?cè)噭?德GMerck公司)
醋酸鈉、冰醋酸均為分析純?cè)噭?br /> 7ACA、D27ACA、DO27ACA、CPC對(duì)照品均由意大利進(jìn)口,其中7ACA含量為96.1%,批號(hào)392001029。
2　色譜條件　
色譜柱:C18色譜柱(416mm×250mm,5um);
流動(dòng)相:0.02mol/L醋酸鈉(用醋酸調(diào)pH**5.5)2乙腈(930∶70);柱溫:35℃,樣品池溫度:8℃;檢測(cè)波長(zhǎng):263nm;流速:0.7mL?min-1;進(jìn)樣量:10uL
3　實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果
3.1　系統(tǒng)適用性試驗(yàn)　
在該色譜條件下混合對(duì)照品及樣品色譜圖(見(jiàn)圖2、3)。從圖中可以看出,各峰之間均達(dá)到基線分離,且樣品各峰的保留時(shí)間同對(duì)照品各峰的保留時(shí)間一致。
 

3.2　線性關(guān)系　精密稱取7ACA對(duì)照品適量,加流動(dòng)相溶解定容后配成2mg/mL的儲(chǔ)備液，分別取儲(chǔ)備液用流動(dòng)相稀釋成40、120、160、200、240、280、360ug/mL的溶液，各進(jìn)樣10uL,記錄峰面積，以峰面積y對(duì)濃度x(ug/mL)作線性回歸，得回歸方程:y=34960x-107535，r=0.9999，表明在40～360ug/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好
3.3　樣品測(cè)定　取本品約20mg，精密稱定，置100ml容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋**刻度，搖勻，取10uL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取對(duì)品適量,同法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算供試品中的7ACA含量，以峰面積歸一法計(jì)算有關(guān)物質(zhì)的含量，結(jié)果(見(jiàn)表)。
 
 
五、高效液相色譜法測(cè)定7-氨基頭孢烷酸含量結(jié)果
根據(jù)上述資料表明，成都科捷應(yīng)用研究所研發(fā)的方法簡(jiǎn)便、快速，靈敏度高，專一性強(qiáng)，線性范圍廣，回收率良好，流動(dòng)相便宜?？勺鰹?-氨基頭孢烷酸含量及其有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定方法，為中間體的質(zhì)量控制提供了參考。